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行业应用

NIGHTSEA荧光观测装置,小巧、简便,轻松观测荧光

点击次数:4981 来源网站: 发布时间:2015-03-16

美国NIGHTSEA专门致力于研究和开发荧光观测装备。NIGHTSEA荧光观测利器包括:SFA-RB体视显微镜荧光适配器,DFP-1双荧光蛋白手电筒系列,BLS2单荧光蛋白手电筒系列等。

 

产品介绍链接:http://www.qbioscience.com/products_t307.html

小巧简便的荧光观测装置,应用如下:

 

美国NIGHTSEA荧光观测利器的应用之——转基因生物观测:如小鼠幼崽,果蝇幼虫,线虫,斑马鱼,等等。

 

1. 观测转基因生物——果蝇


 

2. 观测转基因生物——斑马鱼


 

3. 观测转基因生物——爪蟾


 

4. 观测转基因生物——线虫


 

5.观测转基因生物——蝾螈


 

6.观测转基因生物——拟南芥种子


 

 

 

美国NIGHTSEA荧光观测利器的应用之——样本预筛选和辅助解剖

 

荧光是细胞生物学、神经生物学及其它多个研究领域中一种强大和广泛使用的工具。nightseaDFP-1, BLS2SFA-RB可以用于样本的预筛选、辅助解剖等,下面列举几个实例:

 

1. 荧光蛋白标记的工程病毒载体在神经元功能研究中应用十分广泛,常通过颅内注射研究特定脑区的功能。在此中,常需要对病毒表达区域进行快速解剖用于特定的生化分析。为了提高快速解剖定位精准度,研究人员选用了nightseaBLS2 Bluestar手电筒观测系列,通过配合nightsea滤光眼镜准确确定注射表达了荧光蛋白的伏核区(文献– Xuan Li and Marina E. Wolf, 2011. Visualization of virus-infected brain regions using a GFP-illuminating flashlight enables accurate and rapid dissection for biochemical analysis. J. of Neuroscience Methods, Vol. 201, Issue 1, pp. 177-179. LINK) 

 

EGFP标记的慢病毒质粒注射进小鼠大脑区域(Marina Wolf, Rosalind Franklin University
 

2. 研究者从小鼠大脑中提取GFP标记的背纹体。这项困难的工作因有了NIGHTSEADFP-1BLS2(手电筒和眼镜组合),而变得简单:很容易看到大脑中的目标区域,从而让解剖更准确、精确。

 

小鼠大脑中GFP标记的背纹体(Charles Mazel. Sample photographed at laboratory of Stefano Vicini, Georgetown University

 

3. DFP-1双荧光蛋白手电筒,BLS2单荧光蛋白手电筒,或SFA-RB体视显微镜荧光适配器,可以很快的检测样本是否成功染色(Alexa Fluor 488 Phalloidin标记),如下图:

 
兔腰肌的肌纤维(用Alexa Fluor 488 Phalloidin标记)

左图:白光观测 右图:Royal Blue荧光观测(Motic SMZ-186体视显微镜观测)
 

4.SFA-RB体视显微镜荧光适配器以斑马鱼为模型,观测不同有害化学物(医药、农药、食品添加剂等)对大脑发育的影响。观测图片如下:


基因斑马鱼大脑共聚焦图像

Kaede protein–绿色是未改变的,红色是发生改变的,图片由Robert ThornCreton Lab, 布朗大学)提供
 

5. 荧光是珊瑚采集研究的重要工具。现在,可以用经济又实惠的SFA-RB体视显微镜荧光适配器安装到体视显微镜上检测珊瑚。

下面的图片是通过立体显微镜观看珊瑚虫,由UNCW威尔明顿纳大学Alina Szmant 博士与NIGHTSEA Charles Mazel博士提供



 

 6. 用于结核分枝杆菌重组株的筛选

在结核分枝杆菌中成功构建了高效同源重组系统,利用该系统构建了rv1364cpstP跨膜区、pstP胞外区三个突变株,得到双交换突变株的效率为25-62.5%,从双交换突变株得到无痕缺失突变株的效率为100%。通过gfp作为荧光标记基因,利用NightSea BlueStar蓝光手电筒和滤光眼镜,可以对平板上的基因缺失株直接进行快速判定。

本研究采用nightsea BLS2 BlueStar 蓝色手电筒和滤光镜对平板上的结核分枝杆菌绿色荧光蛋白菌落进行快速鉴定。该方法可以从几百个菌落中瞬间锁定阳性克隆。平板上的菌落照片拍摄用单反相机加载购自nightsea公司的滤光片实现。

 

 图片源自[结核分枝杆菌同源重组基因敲除系统的构建和应用]

 

Good News

 

标准的DFP-1双荧光蛋白观测镜,只有RB-Royal BlueGR-Green两种荧光激发装置,也就是说标准的DFP-1只能用于观测绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白。

现在,您可以选择以下任何两种荧光装置,组装成您专属的双荧光蛋白手电筒啦。

 

荧光装置型号

Excitation

激发光

Emission

发射光

可观测荧光

RB-Royal Blue

440-460nm

500nm LP

GFP, eGFP, fluorescein....

CY-Cyan

490-515nm

550nm LP

YFP, Venus, Lucifer Yellow...

GR-Green

510-540nm

600nm LP

DsRed, dTomato...

VI-Violet

400-415nm

460nm LP

CFP, BFP...

UV-Ultra Violet

360-380nm

415nm LP

DAPI

 

注:

1.RB-Royal Blue用于观测绿色荧光蛋白

GFP:绿色荧光;EGFP:增强型绿色荧光;fluorescein荧光素

2.CY-Cyan用于观测黄色荧光蛋白

YFP:黄色荧光蛋白;Venus:金色;Lucifer Yellow:荧光黄

3.GR-Green用于观测红色荧光蛋白

DsRed:红色荧光蛋白;dTomato:番茄红

4.VI-Violet用于观测紫色荧光蛋白

CFP:青色荧光蛋白;BFP:碱性胎儿蛋白

5.UV-Ultra Violet用于观测紫外光

DAPI:蓝色荧光

 

 

 
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